產(chǎn)品介紹
AMBERCHROMTM XT系列樹(shù)脂是聚合物反相填料，其基質(zhì)是聚苯乙烯-二乙烯基苯。它是現(xiàn)有的AMBERCHROMTM CG系列的改良產(chǎn)品，提供了更好的耐壓性，改善了分離效果，對(duì)于苛刻的在位清洗（CIP）程序也依然很穩(wěn)定。
AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂可用于生物分子的純化，對(duì)于使用者來(lái)說(shuō)，在反相色譜實(shí)驗(yàn)中，相對(duì)于硅膠，它提供了一個(gè)更為經(jīng)濟(jì)的選擇。AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂在分離純化疏水和極性的多肽、小分子蛋白和寡核苷酸上性能優(yōu)越。它很適合分離治療性的蛋白質(zhì)，如胰島素。
由于填料優(yōu)異的pH穩(wěn)定性，它可以分離純化大多數(shù)的多肽和寡核苷酸，這就意味著可以用較少的投入獲得較大的收益。在分離的時(shí)候，AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂可以提供高產(chǎn)率，由于它優(yōu)越的剛性，可以使用在中壓系統(tǒng)上，耐壓60bar。
優(yōu)秀的pH穩(wěn)定性
和反相硅膠填料不同，由于AMBERCHROM? XT樹(shù)脂是聚合物基材，沒(méi)有氫鍵作用，它可以在pH 1~14的范圍內(nèi)使用和清洗。圖1說(shuō)明，使用1.0M NaOH作為在位清洗試劑，在經(jīng)過(guò)70次循環(huán)清洗后，AMBERCHROM? XT樹(shù)脂的保留性沒(méi)有發(fā)生改變。
較高的處理能力
從圖2中可以看出，AMBERCHROM? XT樹(shù)脂和硅膠產(chǎn)品的性能相近。聚合物基材的AMBERCHROM? XT樹(shù)脂可以對(duì)目標(biāo)分離提供更高的效率。
AMBERCHROM? XT樹(shù)脂對(duì)于寡核苷酸的分離，性能良好。以下表1列出了AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂的物理特性。使用一支1cm×25cm裝有AMBERCHROM? XT樹(shù)脂填料的色譜柱，只需要一步就可以分離純化20-聚體的寡核苷酸。具體步驟是：未完全去保護(hù)的天然胸苷，處理后上柱子洗脫。使用陰離子交換色譜進(jìn)行純度測(cè)定。
良好的機(jī)械穩(wěn)定性
一般情況下，聚合物基質(zhì)的樹(shù)脂其剛性都不足以承受高壓，進(jìn)而不適合用于高效液
相色譜儀。
獨(dú)特的選擇性
AMBERCHROM? XT樹(shù)脂的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，就是它的獨(dú)特的選擇性。下圖說(shuō)明，4種血管緊張素在裝有AMBERCHROM? XT樹(shù)脂填料的柱子上可以完全分離開(kāi)，而其他的硅膠基質(zhì)的樹(shù)脂很難做到完全分離。
對(duì)疏水和極性的多肽顯現(xiàn)出良好的分離性能
萬(wàn)古霉素，一種疏水的環(huán)形多肽，作為一個(gè)典型的例子，證明AMBERCHROM? XT樹(shù)脂的分離性能在堿性pH條件下有著明顯的改善。當(dāng)純化過(guò)程在pH 2.0的條件下進(jìn)行時(shí)，AMBERCHROM? XT樹(shù)脂表現(xiàn)出典型的反相洗脫模式。
但是，當(dāng)AMBERCHROM? XT樹(shù)脂在pH 8.0堿性緩沖溶液的條件下使用時(shí)，其分離性能提高一倍，洗脫和純化的能力較傳統(tǒng)工藝有了明顯的改善。
對(duì)萬(wàn)古霉素（Sigma，USP 級(jí)，MW 1485）的精提步驟進(jìn)行了改良。上樣時(shí)的純度約為89%。進(jìn)行提純制備時(shí)，在兩個(gè)不同的pH條件下，使用一支裝有AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂填料的1cm×25cm的色譜柱。色譜條件是：3%~25%的乙腈進(jìn)行線性的梯度洗脫。隨著pH值的增大，純化效果越來(lái)越好。這說(shuō)明，對(duì)于改善純化效果來(lái)說(shuō)，填料有較寬泛的pH穩(wěn)定性是有必要的。
在堿性條件下，萬(wàn)古霉素表現(xiàn)出疏水分子的特性，AMBERCHROM? XT系列樹(shù)脂填料的動(dòng)態(tài)載量翻倍。這說(shuō)明了具有寬泛pH范圍的聚合物基質(zhì)樹(shù)脂的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。
優(yōu)越的動(dòng)態(tài)載量
同競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品相比，AMBERCHROM? XT樹(shù)脂對(duì)寬泛的分子量范圍的分子有著優(yōu)越的動(dòng)態(tài)載量。表2給出了萬(wàn)古霉素（MW 1485）、牛胰島素（MW 5600）和溶解酵素（MW 14000）的動(dòng)態(tài)載量值。測(cè)試使用的條件是0.1% TFA緩沖溶液，線性流速153cm/h。
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結(jié) 論
AMBERCHROM? XT反相樹(shù)脂填料特點(diǎn)如下：
?? 對(duì)生物大分子的載量高；
?? 機(jī)械性能穩(wěn)定；
?? 比硅膠基質(zhì)的樹(shù)脂pH 應(yīng)用范圍廣；
?? 效率高，選擇性獨(dú)特；
?? 對(duì)于多肽和寡核苷酸的分離載量大；
?? 是分離疏水和極性的多肽的理想介質(zhì)；
